单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于抗原种类特男人、寡核苷酸突显料工费激昂或运营步骤有难度。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯硕士生导师团对在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低代价、跨种群、全系统兼容的全新解决方案。

杂志期刊概况

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由全球完美合理院基因与發育菌物学完美科研院和全球基因学到主办人的國际学界交流刊物，锐意创新于新闻报导自己生命完美合理和医美基因学范畴的全国散文网性完美微生物体学研究成功。JGG 202四年度应响细胞7.1，Scopus学界交流刊物口碑质量指标CiteScore 9.9，居首JCR 202四年度GENETICS & HEREDITY范畴Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY范畴Q1区，居首全球完美合理院刊物系统分区菌物学类1区(Top刊物)，基因学和微生物化与分子式菌物学小类双1区。

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哪种是HEATag

婉转的“二三合一”制作

HEATag是由凝集素和HUH内切酶分为的交融血清

「精准定位器」板块 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化体现（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「相连器」接口 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）检索长商品条形码参与共价联接。

“1+1>2”的结果：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行样本量标志与产品追溯。

Fig1: HEATag多方面标出机理提醒图

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初级教程产品检验

HEATag究竟 有可以打？

也可以在有所不同具体条件下，建立哺乳期间哺乳动物内部系单内部混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。设计精英团队为 HEATag 装置了多轮 “负压各种测试”，从组织細胞系到组织細胞核，从室温到低温环境，从新鲜样品到固定位置样品，全位置查证它的稳定性分析性和靠谱性。

一、轮测试测试根据辅乳植物癌细胞核系系：探讨员首选了基人、鼠、仓鼠三种种类的三种癌细胞核系（HEK293T、K562、MEF、CHO），在环境温度下使用 HEATag 标志后搭配测序。最中回收分类处理的 11447 个癌细胞核系中，85.66% 都能采用 HEATag 长方形码查询精确度切换到原种类，范本间交叉式生态破坏很少，UMAP 聚类算法浅析是间接证明材料，HEATag 长方形码查询与种类非特异聊天表观遗传组本质特征高宽比不对。 又，测试图片前提进几步强制升级：探析有关系人员成功在 4℃下标注最最新鲜组织、在制冷下标注甲醇固定位置不变组织，可能会标注组织核。没想到但早已吸睛：各种前提下，样版产品标签与外来物种信心均都具有良好 的有关系性，转换精确度率超 95%。殊不知甲醇固定位置不变会诱发中度的转录本交差废弃物，组织核配制很有可能一点 RNA 引流，组织的类型的注脚没想到但早已与最最新鲜样版稳定同步，证明材料 HEATag 应该标注不一样的补救前提下的实验报告样版。

Fig2: HEATag 可在不一样的能力下进行单細胞转录组混样研究分析

可能符号母乳喂奶生物和深海无脊椎骨生物的原代内部

只要说受损血细胞系检查是 “基础条件题”，那团队模本是 “扩展题”， 这部分模本不仅因受损血细胞款式繁复、环境不适宜性特别的，变成标识技木的 “突破点”，而 HEATag 恰恰舞在这部分 “突破点” 上展现什么了优劣势。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸结构，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞实际上能被精准识别，所有关键神经元型的聚类分析法可是都明白可辨。

更令人惊喜的是HEATag对浮游生物学生物学的兼容性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 长商品条形码与种类转录组享有较高完全稳定性、完整性，不能导至因高盐的环境导至的 “标出就失效”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可推动辅乳猎物团体样例多种 scRNA-seq 讲解

Fig4: HEATag可做到新鲜松茸海洋环境无脊梁骨各种动物强有力的加密管控 scRNA-seq 了解

HEATag与受损细胞的综合不是因起转录组的为显著变动

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在做好记号每日任务的一并，会对以后的转录成分析造打扰，确定了探究数剧的实际性。

Fig5: HEATag不想引响样表的 RNA 展现经营模式

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前景可期

HEATag 能为单神经细胞科学研究介绍些什么？

HEATag 的市场价值，远不单单于 “来解决标注大问题”，它的灵活机动性和共通性，真正为单体细胞学习开启更好地将性

从操作动画场景来谈

HEATag 能涵盖从 “简约非常介绍”（如癌结构与一切正常结构、药加工处理与對照）到 “大产值探讨”（如结构内部图谱设计、高通骁龙量淘汰）的全面积所需。逐渐 PIP-seq、Stereo-cell 等创新型可扩充技术设备的发展方向，HEATag 还能进每一步提高了单内部探讨的通量，机械助力科研工作拜谱生物开设较大产值的创业项目。

从跨领域发展潜力方面看

HEATag 这不仅可用在转录组学，还能与表观基因组组学、蛋白质含量质组学、的空间组学等技艺整合，采用个人定制引索和寡核苷酸编码序列，HEATag 可容易带入不一样的的组学流程图，不作用无线信号捕捉强度。同一时间，源于HEATag还可成长 单组织细胞糖组学研究探讨技艺。

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合作关系动态图

拜谱生物技术与陈凯教导完成第一次企业合作意愿

非常值得目光的是，在 HEATag 技術性表流露出强大运用潜能的情况下，拜谱怪物已与我国南部海底小学科学与工程建筑湖南省调查室（珠海）陈凯副教授实现目标分步合作方式意愿。对方方案着力 HEATag 技術性的财产化趴地、的研究生成等方向盘实现高度警税，确保某种降低成本费、跨动物群的单神经元箭头技術性很快运用于现场的研究场地，为其他调查室提供了高效、性价比最高、经济增长的单神经元的研究软件，四轮驱动的研究做工小说家在神经元怪物学、海底怪物学、妇科疾病机理等邻域拿得其他冲破